凍存過的全血為什么不建議再拿來做ELISA實(shí)驗(yàn)

很多ELISA實(shí)驗(yàn)新手客戶都會(huì)咨詢我司技術(shù)能否把全血提取出來放-70℃條件保存，等實(shí)驗(yàn)開展了（比如一個(gè)月左右的時(shí)間）再離心全血取血清或者血漿做ELISA實(shí)驗(yàn)？這種做法我司技術(shù)都是持反對(duì)建議的。與此同時(shí)，也是明確要求我司銷售人員在與客戶售前溝通時(shí)建議老師全血樣本提取好了應(yīng)該及時(shí)離心出血清或者血漿。并要求-70℃條件下保存，如果一個(gè)月左右可以開展實(shí)驗(yàn)可以-20℃保存，期間不能反復(fù)凍融。至于凍存后的全血不可以再提取血清、血漿樣本來做elisa的具體原因如下：

原因一、全血凍存后解凍，用常規(guī)離心方式提取血清仍然是可以的，*不利的一點(diǎn)是，伴隨凍融的過程，會(huì)出現(xiàn)比較嚴(yán)重的溶血事件。而zui后提取出來的血清能否做elisa，主要取決于溶血程度、你所要檢測(cè)的目標(biāo)蛋白的性質(zhì)及你實(shí)驗(yàn)的zui終目的。

原因二、溶血釋放的胞內(nèi)組分往往容易影響本底，甚至出現(xiàn)假陽性；而蛋白酶的釋放可能導(dǎo)致目的蛋白的降解zui終影響結(jié)果；目的蛋白的大小、穩(wěn)定性、特異性（相對(duì)抗體而言）又影響其自身與酶標(biāo)板的吸附、自身降解、自身與抗體的結(jié)合率等等。以上各種不確定性因素存在下，如果你只是對(duì)血清中某種血清蛋白做定性檢測(cè)的話，做elisa應(yīng)該問題不大；若是定量分析的話，從可靠性的角度上看，不建議該做法。