隨著時(shí)代的發(fā)展，現(xiàn)如今的生命科學(xué)事業(yè)也在蓬勃發(fā)展，國(guó)內(nèi)越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室開(kāi)始做起了細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)實(shí)驗(yàn)，如果你打算或者是正在做細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)?zāi)敲匆韵碌膬?nèi)容會(huì)對(duì)你的實(shí)驗(yàn)有所幫助。
1、選擇正確的培養(yǎng)基
在養(yǎng)細(xì)胞之前，就要了解，你所養(yǎng)細(xì)胞的來(lái)源以及種類(lèi)和名稱，查閱一定量的文獻(xiàn)，確定所需培養(yǎng)液種類(lèi)以及是否需要添加特殊成分，常用的細(xì)胞培養(yǎng)液有DMEM、RPMI1640、F12等等，一些常見(jiàn)的細(xì)胞基本可以使用這幾種培養(yǎng)基中的一種來(lái)培養(yǎng)，有的需要加入一定其他成分，這需要根據(jù)不同的細(xì)胞類(lèi)型，查ATCC細(xì)胞庫(kù)或者查文獻(xiàn)，才能找到所需要的培養(yǎng)液。（選擇正確的培養(yǎng)液是養(yǎng)好細(xì)胞的第1步）
2、了解細(xì)胞的生長(zhǎng)習(xí)性
不同的細(xì)胞生長(zhǎng)習(xí)性不同，如成纖維細(xì)胞是貼壁生長(zhǎng)，有一定的密度依賴性，密度小可能會(huì)出現(xiàn)不增殖，狀態(tài)差的情況，接種密度大時(shí)則需要隔天傳代，頻繁傳代則影響細(xì)胞狀態(tài)；再如RPMI-8226人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞，是懸浮生長(zhǎng)的，傳代需離心棄去上清即可。總之，了解細(xì)胞生長(zhǎng)習(xí)性，再加上正確的計(jì)數(shù)，才能掌握好傳代的密度。
3、選擇優(yōu)質(zhì)的血清
血清中含有細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的生長(zhǎng)因子，作為哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的附加物，血清的添加是十分重要的，因此，選擇優(yōu)質(zhì)的血清，是細(xì)胞養(yǎng)殖成功與否的關(guān)鍵！
4、及時(shí)傳代和更換培養(yǎng)液
在細(xì)胞增殖到一定的密度后要及時(shí)傳代，根據(jù)細(xì)胞的生長(zhǎng)速度和密度，及時(shí)更換培養(yǎng)液。更換過(guò)勤，浪費(fèi)培養(yǎng)液，若不夠及時(shí)，則細(xì)胞狀態(tài)轉(zhuǎn)差，一般需隔天更換培養(yǎng)液，具體可根據(jù)所養(yǎng)細(xì)胞種類(lèi)予以調(diào)整。
5、絕對(duì)的無(wú)菌意識(shí)
如果無(wú)菌意識(shí)差，當(dāng)細(xì)胞中混入了微生物，將會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)功虧一簣，細(xì)菌的生長(zhǎng)速度和破壞力，將迅速占領(lǐng)培養(yǎng)皿，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，有些初學(xué)者會(huì)在培養(yǎng)液中加入1%的雙抗，但無(wú)菌意識(shí)不強(qiáng)，雙抗亦無(wú)法拯救你的細(xì)胞！所以在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中需要有這絕對(duì)的無(wú)菌意識(shí)才可保障細(xì)胞培養(yǎng)完好。
6、傾心的呵護(hù)，頻繁的觀察
做到以上幾點(diǎn)，就可以開(kāi)始養(yǎng)你的細(xì)胞了，但需要再次和大家強(qiáng)調(diào)的是細(xì)胞嬌弱，在養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中，難免會(huì)出現(xiàn)一些問(wèn)題，要想成功培養(yǎng)好細(xì)胞，應(yīng)時(shí)時(shí)注意并且不斷地對(duì)細(xì)胞進(jìn)行觀察，初期一天可以觀察個(gè)兩次以上，出現(xiàn)任何預(yù)料外的情況應(yīng)及時(shí)處理，才能保障后期收獲一盤(pán)“漂亮"的細(xì)胞。
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