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人白細(xì)胞介素4試劑盒操作注意事項(xiàng)

  • 發(fā)布日期:2011-09-26      瀏覽次數(shù):2079
    •       人白細(xì)胞介素4試劑盒操作注意事項(xiàng)

       

      本試劑盒僅供研究使用。
      檢測(cè)范圍:                                                          96T
      15ng/L -480ng/L
       
      使用目的:
      實(shí)驗(yàn)原理
      人白細(xì)胞介素4試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人白細(xì)胞介素-4IL-4水平。用純化的人白細(xì)胞介素-4IL-4抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素-4IL-4再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素-4IL-4抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素-4IL-4呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人白細(xì)胞介素-4IL-4濃度。
      試劑盒組成

      1
      30倍濃縮洗滌液
      20ml×1瓶
      7
      終止液
      6ml×1瓶
      2
      酶標(biāo)試劑
      6ml×1瓶
      8
      標(biāo)準(zhǔn)品(960ng/L)
      0.5ml×1瓶
      3
      酶標(biāo)包被板
      12孔×8條
      9
      標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
      1.5ml×1瓶
      4
      樣品稀釋液
      6ml×1瓶
      10
      說(shuō)明書(shū)
      1份
      5
      顯色劑A液
      6ml×1瓶
      11
      封板膜
      2張 
      6
      顯色劑B液
      6ml×1/瓶
      12
      密封袋
      1個(gè)

      標(biāo)本要求
      1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
      2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
      1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
      2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
      3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
      4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
      5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
      6.底物請(qǐng)避光保存。
      7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
      8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
      9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
      10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
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